Kidney Int ：肾小管生物钟调节失调导致糖尿病患者肾糖异生增强和加重高血糖

背景及目地：在肾病病人中所，十二指肠通过增加原胃中所的重吸收和上调桡骨小管中所的新陈代谢来倡导肾病高皮质醇的发生。然而，皮质醇水平的慢性升高可能反过来造成了肾病病变(DN)，这是肾病最严重的心肌梗死之一，其特征是肾小球、肾小球和十二指肠血管受损。虽然细胞内应激是肾病病变发生和发展的主要因素，但在大多数肾病病人中所，高皮质醇本身并不会造成了肾功能不全。这表明，合并症或环境、遗传基因或表观遗传基因的巨大变化可能是启动和/或加速进展DN所必需的。表征反应是一种普遍存在的分子定时机制，它将肝细胞、组织和系统的生物体功能与24每隔的环境周期同步。局部表征反应液压肝细胞类DF和组织特有的表征，它们的功能障碍与一系列哮喘的发病和/或进展有关。然而，肾病病人十二指肠中所内在表征反应的病因表征作用仍不确切。

原理：为了解决这个缺陷，我们用单链胺类佐红霉素抑止了脚肝细胞(cKOp激素)或肾小球(cKOt激素)中所缺失表征转录调节因子BMAL1的激素患IDF肾病。

激素模DF高纯度：8周龄Bmal1lox/lox/Nphs2-RTTA/LC1激素(cKOp激素)或8周龄Bmal1lox/lox/Pax8-RTTA/LC1激素(cKOt激素)经DOX(饮水中所2 mg/ml)处理方式2周后，Bmal1(ARNTL)基因序列失活。他们的IgG(Bmal1lox/lox激素)放弃相同的DOX疗程。在DOX疗程结束一周后，通过胸腔药剂单链胺类佐红霉素(STZ，50 mg/kg体形，每日5天)抑止IDF肾病。溶媒处理方式的激素放弃PBS的溶媒药剂。所有试验中所均在最后一次药剂STZ或溶媒8周后进行。在所有试验中所中所，从ZT9赐死的激素身上采集组织和血液(ZT-Zeitgeber时间的单位；ZT0是点亮时间，ZT12是关灯时间)。

细胞内腺体：激素被饲养在个体细胞内腺体子中所(Tecniplast，意大利)。在4天的适应期后进行24每隔的体液获取。

血红蛋白和体液生化校准：用Vaudois中所心医院临床试验中所室(LCC)校准胃和血红蛋白Na+、K+、Ca2+、Mg2+、磷硫盐、肌酐、、胃硫和甲醛电导率及微血管。用二氯甲烷皓(Metrohm)校准体液pH值。运用于EPOC血液数据分析皓(阿尔斯通医疗)探测动-静脉混和血的血液pH值和血气。胃铵校准改用Berthelot法则。胃可高锰硫钾硫校准改用Chan25原理。改用放射免疫法则(DPC)校准血红蛋白醛固酮水平。用Mercodia美国公司的试剂盒校准血红蛋白甲状腺激素。

耐量试验(GTT)：禁食15每隔后，给空白IgG和cKOt激素胸腔药剂(1g/kg体形)。分别于药剂前(t=0)、药剂后15、30、60、90、120、180min，用皮质醇量度皓校准皮质醇。

甲状腺激素耐量试验(ITT)：禁食4h后，给IgG和cKOt激素胸腔药剂0.5U/kg体形的分拆人甲状腺激素(人分拆甲状腺激素，Sigma)。分别于甲状腺激素药剂前(t=0)、甲状腺激素药剂后15、30、45、60、90、120、150、180min校准皮质醇。如果皮质醇降至2 mm不限，则通过胸腔药剂30毫克救激素，并将其排除在数据分析均。

RNA测序技术：RNA-SEQ按照Ansermet等人在6.Mus Musculus中所的刻画进行。运用于GRCm38.92基因序列注释。运用于TMM归一化对基因序列计数进行定标，并运用于LIMMA R包内27中所的“CPM”函数将其下式转化为每百万计数(CPM)。计算了KO和Ctrl动物在原于方式(PBS)和处理方式(STZ)条件下的区别表达以及两者之间的相互作用。对于这三种尤其中所的每一种，选择FDR

结果：在患有肾病的cKOp和cKOt激素中所，表征反应外周与肾病病变的发生没有表征。然而，与单链胺类佐红霉素疗程的IgG来得，患有肾病的cKOt激素乏善可陈出加高皮质醇加重，胃中所肠道增加，多胃增加，十二指肠肥大更显著。mRNA和蛋白质表达数据分析显示，与肾病IgG激素来得，cKOt肾病激素十二指肠中所的新陈代谢简而言之显著增强。CKOt肾病激素的转录数据分析和功能数据分析确定了直接或间接影响新陈代谢简而言之的多种机制的巨大变化。

得出结论：我们证明内在肾小球表征反应外周可通过增强肾桡骨小管的新陈代谢而加重肾病高皮质醇，进一步强调了表征反应调节在肾病病人中所的重要性。

原文记事：

Ansermet C， Centeno G， Bignon Y，et al.Dysfunction of the circadian clock in the kidney tubule leads to enhanced kidney gluconeogenesis and exacerbated hyperglycemia in diabetes.Kidney Int 2021 Nov 24